1. 基本特性?

• ?分子量?：35-36 kDa（重組人源Annexin V）

• ?標記物?：FITC（異硫氰酸熒光素），激發波長494 nm，發射波長516-518 nm（綠色熒光）

• ?保存條件?：-20℃避光保存，避免反復凍融

?2. 作用機制?

• ?靶標結合?：

• Annexin V是鈣離子依賴性磷脂結合蛋白，特異性識別凋亡早期細胞膜外翻的磷脂酰絲氨酸（PS）?12。

• 健康細胞中PS位于膜內側，凋亡時通過caspase激活的刮板酶（scramblase）翻轉至外側?13。

• ?檢測原理?：

• FITC標記后保留PS結合能力，通過熒光信號區分凋亡細胞（綠色熒光）與正常/壞死細胞（需結合PI/7-AAD）?

?3. 應用場景?

• ?流式細胞術?：定量凋亡細胞比例（如藥物篩選、腫瘤研究）?24。

• ?熒光顯微鏡?：直接觀察組織或細胞中的凋亡信號?35。

• ?多重檢測?：可與其他熒光探針（如線粒體膜電位染料）聯用?

4. 實驗注意事項?

• ?鈣離子依賴?：需含Ca2?的緩沖液（如1× Binding Buffer）?14。

• ?避光操作?：FITC易光解，孵育和檢測需避光?25。

• ?區分凋亡階段?：

• ?早期凋亡?：Annexin V+/PI-

• ?晚期凋亡/壞死?：Annexin V+/PI+?

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